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    L4440质粒

    简要描述:L4440质粒生长条件:LB +氨苄青霉/素,37℃(克隆菌株DH5α,2790bp)

    • 更新时间:2024-07-16
    • 厂商性质:生产厂家
    • 生产地址:上海
    • 访  问  量:347

    详细介绍

    品牌YLKBIO货号YLK-J3464h
    规格质粒干粉供货周期现货
    主要用途科研应用领域化工,生物产业

    感谢您选择k8凯发(中国)(上海)生命科学有限公司提供的微生物菌种。本中心目前有标准菌种(斜面、甘油菌、穿刺菌和冻干粉四种形式)、基因工程菌种 (斜面、甘油菌和穿刺菌三种形式)、食用益生菌和工业发酵菌种,基本涵盖了环境、工业、农业、分析、食品、药用真菌等各类生产和科研微生物。微生物总种类达到 2000 多种,并且该数量每天正在不断增加。


    菌种简介:


    产品名称L4440质粒
    拉丁文名称
    产品规格质粒干粉
    L4440质粒主要应用研究、教学






    菌种培养条件:



    培养基名称:酵母膏:5.0,蛋白胨:10.0,NaCl:10.0,pH:7.0(25℃)


    生长条件:LB +氨苄青霉/素,37℃(克隆菌株DH5α,2790bp)


    存储条件:2-8℃


    安全等级:0


    操作步骤:

    1.溶解: 收到质粒干粉后,请加入 20μl 无菌水至管底,溶解质粒,室温静置 1min;

    2.混合(吸附质粒): 200μl 感受态细胞 + 质粒 DNA 5~10µl 混匀,冰上放置 30min;

    3.热激导入: 42℃静置 90s;

    4.收缩膜孔: 冰浴 2min;

    5.修复培养: 毎管加 800µl LB 液体培养基,37 ℃培养 1h 150 r/min;

    6.筛选培养: 将适当体积(100 µl)的复苏细胞,涂布在相应抗性的 LB 平板上,正置平皿 30min(琼脂面务必干燥后), 倒置培养 12-16h,出现菌落。

    7.提取: 挑取单克隆菌落至相应抗性 LB 液体培养基中,震荡培养 12-16h,根据试验需要提取质粒。


    提供形式:质粒干粉


    菌种培养注意事项:

    1.微生物菌种应保存于低温、清洁和干燥的地方,室温放置时间过长会导致菌种衰退;

    2.菌种操作在无菌条件下进行,接种完毕应该灭菌再做丢弃处理;

    3.斜面菌种和穿刺菌种保存时间通常为 3-6 个月,应根据菌种状况及时结转;冻干粉保存时间通常是 2-25 年;甘油菌保  存时间为 2-5 年;

    4.冻干首-次活化,干粉要全部用完,不能保留。用0.2-0.5m1的培养液或者无菌水溶解,接种在1-2个平板上,因冻干菌种处于休眠状态,请勿接种多个平板,以免因接种量不足而导致复苏不成功。

    5.如果有不明白之处,应先与我中心联系,避免不必要的损失。


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